Microscopia Digitale e Confocale

Una stazione automatizzata per l'imaging digitale dei parametri citometrici nelle cellule viventi. Il riconoscimento automatico degli oggetti consente di utilizzare protocolli ad alto contenuto/rendimento per i principali eventi cellulari (apoptosi, necrosi, autofagia/mitofagia, cicli cellulari, cambiamenti morfologici, espressione proteica, analisi automatizzata per FISH e localizzazione e traslocazione proteica.

Sistema di microscopia a fluorescenza ad alta risoluzione a lunghezza d'onda multipla. L'alta risoluzione del sistema consente di effettuare analisi 2D/3D delle strutture e dell'organizzazione intracellulare (ad es. mitocondri, reticolo endoplasmatico e citoscheletro). Inoltre, le lunghezze d'onda multiple e la versatilità del sistema consentono di eseguire misurazioni in tempo reale di sonde ratiometriche come fura o pericam.

Sistema di microscopia a fluorescenza confocale ad alta velocità per l'analisi in vivo di più parametri cellulari. Il sistema consente la misurazione simultanea di parametri cellulari quali concentrazione di calcio (citoplasmatico/mitocondriale), traslocazione proteica, riorganizzazione della struttura cellulare e generazione, perdita e fusione vescicolare. Sono montate tre linee di eccitazione, basate su laser a stato solido (488 nm, 561 nm, 635 nm) e due diversi set di filtri di emissione (488/561, 488/643). Questo sistema consente di visualizzare due diversi fluorofori contemporaneamente.

L'analizzatore di flusso extracellulare Seahorse XF96 misura simultaneamente la respirazione mitocondriale e la glicolisi nelle cellule in tempo reale. Questo strumento fornisce la misurazione in vitro più fisiologicamente rilevante per la tua ricerca sul metabolismo cellulare in cellule primarie e linee cellulari tumorali, sia cellule aderenti che in sospensione, così come isolotti e mitocondri isolati; si basa su piastre calibrate con composti fluorescenti per la misurazione simultanea dei livelli di ossigeno e del pH nel mezzo. Misurando i parametri chiave del metabolismo cellulare, fornisce dati funzionali che consentono una maggiore comprensione del cancro, dell'invecchiamento e delle malattie metaboliche, cardiovascolari e neurodegenerative.

Sistema manuale per l’imaging digitale e confocale di parametri mitocondriali in animali vivi (topo da laboratorio). L’utilizzo dei LED ad elevata potenza e la capacità di acquisizione in confocale permettono il rilevamento e l’analisi di sonde localizzate in tessuti o nella massa tumorale, diversi micron al di sotto della lente dell’obiettivo. L’acquisizone in lunghezza d’onda multipla permette le misure in live di sonde raziometriche come FURA red e JC-1. Si possono infatti condurre esperimenti in vivo di potenziale di membrana mitocondriale, flusso intracellulare di calcio (mitocondriale e citosolico) e morfologia mitocondriale 

SPECIFICHE TECNICHE

Filterset e camera:

CrEST con profilo spettrale DAPI/FITC/ORANGE/RFP e camera

 Photometrics EVOLVE

Ingrandimenti: 

• LUMPLFLN 40X W, Apertura numerica: 0.8, Distanza di lavoro (mm) : 3.3

• UPLFLN 10X, Apertura numerica: 0.3, Distanza di lavoro (mm): 10

Controllo ambientale:

Termostato per piccoli roditori con controllo digitale della temperatura

Microiniettore:

Eppendorf Transjector per la microiniezione di molecole in situ (nella massa tumorale o in una determinata zona anatomica dell’animale anestetizzato) è dotato di un sistema incorporato di pressione/vuoto che consente di raccogliere, trattenere e rilasciare qualsiasi tipo di sostanza (farmaci, composti chimici, sonde e oociti).