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Citofluorimetria

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STRUMENTAZIONI

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Strumentazioni

La citofluorimetria è una tecnica multiparametrica che analizza e separa cellule in sospensione liquida, superando la microscopia in velocità e quantità di cellule processate. Impiegata in ricerca in biologia molecolare e cellulare, immunologia, oncologia è diventata uno strumento diagnostico essenziale. I citofluorimetri "sorter" permettono di isolare cellule vive con specifiche caratteristiche, utili per studiare popolazioni cellulari rare.

Oltre al suo impatto nella ricerca accademica, la citometria a flusso trova largo impiego anche nell'industria. Ad esempio, è utilizzata per valutare l'efficacia e la tossicità di nuovi farmaci, sonde fluorescenti e anticorpi. Questa tecnica consente, poi, di monitorare l'efficienza di cellule ingegnerizzate, ottimizzando la produzione di biofarmaci. Infine, la citometria a flusso gioca un ruolo fondamentale nel controllo di qualità degli emocomponenti, garantendo la purezza e la vitalità delle cellule durante i processi produttivi.

In conclusione, la citometria a flusso, con la sua versatilità e precisione, ha trasformato la ricerca biomedica e industriale, aprendo nuove prospettive per la comprensione dei processi cellulari e lo sviluppo di soluzioni di indagine e terapeutiche avanzate.


Il nostro servizio comprende due analizzatori (FACSCalibur e Cytek® Northern Lights) e un sorter (BD FACSARIAIIIu).

La nostra facility si avvale del software FlowJo per l’analisi dei dati. Questo potente software di analisi citfluorimetrica permette l’analisi di dati provenienti da qualsiasi citofluorimetrio e permette l’esecuzione di analisi complesse, rendendo più efficiente, facile e veloce il processo di analisi delle acquisizioni multiparametriche.

FACSCalibur BD Analyzer

Citometro a flusso da banco dotato di due sorgenti luminose spazialmente separate: un laser argon, raffreddato ad aria, con emissione a 488 nm ed un laser rosso a diodo (Visible Red Diode Laser) con emissione a 635 nm. La configurazione ottica permette di analizzare fino a 6 parametri di cui 4 di fluorescenza, consentendo la massima flessibilità nella scelta dei fluorocromi.

Ideato specificatamente per supportare un ampio range di applicazioni, il FACSCalibur è caratterizzato da un elevato livello di automazione (controllo strumentale gestito via software, controllo digitale della fluidica) per garantire l’estrema riproducibilità dei risultati ottenuti.

Cytek® Northern Lights

Citometro spettrale, dotato di 3 sorgenti laser (488nm - blu, 633nm - rosso, 405nm – violetto) che permette di analizzare contemporaneamente fino a 30 parametri, di cui 25 di fluorescenza.

La citometria a flusso spettrale, rispetto a quella convenzionale, facilita l’analisi multicolore. Essa si basa su molti degli aspetti fondamentali della citometria a flusso convenzionale, ma offre capacità di raccolta ottica e analitiche uniche.

Nella citometria a flusso spettrale, lo spettro di emissione di ogni molecola di fluorescenza viene catturato da un insieme di rilevatori in un intervallo di lunghezza d'onda definito.

Il citometro Cytek® Northern Lights™ risolve i differenti fluorocromi sfruttando le differenze nelle firme spettrali di emissione, di ognuno di essi, provenienti da tutti i laser, anche in caso di co-espressione dei marcatori. Il suo design ottico e l'algoritmo di unmixing offrono una notevole flessibilità, consentendo l'utilizzo agevole di un'ampia gamma di combinazioni di fluorocromi anche nel caso di fluorocromi con emissioni di picco altamente sovrapposte senza sacrificare la risoluzione.

Inoltre, nella citometria, la risoluzione del segnale di fluorescenza è inversamente proporzionale al contenuto di autofluorescenza del campione. L'estrazione dell'autofluorescenza diventa fondamentale per la risoluzione di marcatori debolmente espressi nelle analisi di immunofenotipo, riducendo al minimo le incongruenze derivanti dalle variazioni dell'autofluorescenza cellulare intrinseca.

Il citometro Cytek® Northern Lights™ è in grado di estrarre l'autofluorescenza del campione, facilitando notevolmente la risoluzione delle popolazioni di interesse.

 

SPECIFICHE TECNICHE

  • Analizzatore spettrale ad alta processività

  • 3 lasers con lunghezze d’onda violet (405nm), blue (488nm) and red (640nm)

  • Acquisizione digitale fino a 35000 eventi/sec

  • Analisi multiparametrica fino a 30 parameteri

  • Automated Sample Loader compatibile con piastre da 96 pozzetti e 40 porta tubi

Cell Sorter BD FACSAria IIIu

Citometro e cell-sorter ad alte prestazioni, dotato di 4 sorgenti laser (488nm - blu, 633nm - rosso, 405nm - violetto, 375nm - near UV); permette di analizzare contemporaneamente fino a 13 parametri, di cui 11 di fluorescenza.

Il numero di laser installati, in associazione al rivoluzionario banco ottico, consentono un notevole ampliamento del numero di fluorescenze che lo strumento può analizzare simultaneamente e conseguentemente della scelta dei fluorocromi utilizzabili.

Le superiori prestazioni del sistema di eccitazione e di raccolta delle fluorescenze, dell’elettronica e del software FACSDiva 9, coadiuvate dalla semplicità d’uso dello strumento e dalla rapidità di settaggio strumentale, dovuta all’introduzione della tecnologia di allineamento fisso, che garantisce anche un’elevatissima riproducibilità, rendono il FACSAria IIIu il cell sorter d’elezione nel moderno laboratorio di ricerca biomedica.


SPECIFICHE TECNICHE

  • Cell sorter ad alta processività, con cuvetta di tipo quadrato ad alta sensibilità

  • 4 lasers con lunghezze d’onda nearUV (375nm), violet (405nm), blue (488nm) and red (633nm)

  • Acquisizione digitale fino a 70000 eventi/sec

  • Velocità di sorting fino a 20000 eventi/sec

  • Analisi multiparametrica fino a 12 parameteri

  • Nozzle da 70μm, 85μm, 100μm and 130μm

  • Possibilità di sorting a 4 vie in eppendorf da 1.5ml o tubi da 4ml

  • Single cell sorting in piastre da 6-, 24-, 96- and 384- pozzetti o in vetrini per miscroscopia

LTTA

via Fossato di Mortara, 70

44121 Ferrara

Ingresso principale • Piazzale Eliporto 

TECNOPOLO DI FERRARA

Via Saragat, 13

44122 Ferrara

tecnopolo@unife.it

Tel. +39 0532 293261

LINK
  • Dip. di Medicina Traslazionale e per la Romagna

  • Dip. di Scienze dell'Ambiente e della Prevenzione 

CLUST-ER
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